Περίληψη

Αυτή η αναφορά παρέχει μια λεπτομερή τεχνική ανάλυση του τοξικολογικού και γονοτοξικολογικού προφίλ των όξινων ολιγοσακχαριτών που προέρχονται από πηκτίνη-(PAOS), μιας συγκεκριμένης μορφής Τροποποιημένης Πηκτίνης Εσπεριδοειδών. Η ανάλυση βασίζεται στη συνολική αξιολόγηση ασφάλειας από τους Garthoff et al. σεΡυθμιστική Τοξικολογία και Φαρμακολογία (2010).¹Οι βασικοί τομείς εστίασης περιλαμβάνουν τον φυσικοχημικό χαρακτηρισμό και το προφίλ καθαρότητας του υλικού, μια κριτική ερμηνεία του αποκλίνοντος

in vitroέναντιin vivoδεδομένα γονοτοξικότητας και η μηχανιστική αποσαφήνιση μιας ειδικής-υπερπλασίας του ουροθηλίου που παρατηρείται σε μοντέλα τρωκτικών. Τα δεδομένα δημιουργούν συλλογικά ένα ισχυρό προφίλ ασφάλειας για αυτό το νέο πρεβιοτικό συστατικό.

Χαρακτηρισμός υλικού και Προφίλ καθαρότητας

Το παρασκεύασμα PAOS που αξιολογήθηκε στις βασικές μελέτες ασφάλειας παρήχθη από πηκτίνη -ποιότητας τροφίμων μέσω μιας συγκεκριμένης ενζυματικής μεθόδου. Η διαδικασία χρησιμοποιεί πολυ(μεθοξυ- -γαλακτουρονίδιο) λυάση (EC 4.2.2.10) και πολυ(1,4{6}}άλφα-D-γαλακτουρονίδιο) γλυκανυδρολάση (EC 3.2.1.15), αμφότερες προερχόμενες από μη παθογόνες{10}Aspergillus niger.¹Το προϊόν που προκύπτει είναι ένα μείγμα γραμμικών ολιγομερών του γαλακτουρονικού οξέος, με βασικές προδιαγραφές ταυτότητας που περιλαμβάνουν περιεκτικότητα σε γαλακτουρονικό οξύ 62 g/100 g, μοριακό βάρος κυρίως κάτω από 3800 Da (94 g/100 g) και βαθμό μεθυλίωσης 50.¹

Για οποιοδήποτε υλικό που προορίζεται για διατροφικές ή ερευνητικές εφαρμογές, το προφίλ καθαρότητας είναι υψίστης σημασίας. Η παρτίδα του PAOS που χρησιμοποιήθηκε στις μελέτες αναλύθηκε διεξοδικά για προσμείξεις και υπολείμματα. Τα επίπεδα τωντροποποιημένα βαρέα μέταλλα πηκτίνης εσπεριδοειδώνκαι άλλες προσμείξεις βρέθηκαν να είναι εξαιρετικά χαμηλές, σύμφωνα με τις αρχές της σχετικής νομοθεσίας και της Ορθής Γεωργικής Πρακτικής.¹Μια περίληψη αυτών των ευρημάτων παρουσιάζεται παρακάτω.

Δεδομένα εξήχθησαν από Garthoff et al., 2010¹

Τα χαμηλά επίπεδα-ανά{1}}κιλό για βασικά βαρέα μέταλλα όπως το κάδμιο, ο μόλυβδος και ο υδράργυρος υπογραμμίζουν την καθαρή φύση της πρώτης ύλης και της διαδικασίας παραγωγής.

Μια Κριτική Ανάλυση των Δεδομένων Γονιδιοτοξικότητας

Η αξιολόγηση γονοτοξικότητας του PAOS έδωσε αποτελέσματα που υπογραμμίζουν τη σημασία της εξέτασης της πλήρους τοξικολογικής εικόνας, ιδιαίτερα της σχέσης μεταξύin vitroκαιin vivoδεδομένα. Το PAOS δεν ήταν οριστικά μεταλλαξιογόνο στον προσδιορισμό βακτηριακής αντίστροφης μετάλλαξης (δοκιμή Ames) σε πέντε στελέχη, με και χωρίς μεταβολική ενεργοποίηση.¹

Ωστόσο, τοin vitroοι αναλύσεις κυττάρων θηλαστικών παρήγαγαν πιο πολύπλοκα αποτελέσματα. Η δοκιμασία λεμφώματος ποντικού κρίθηκε "αμφίβολη" λόγω θετικών αποκρίσεων σε υψηλά κυτταροτοξικές συγκεντρώσεις που δεν ήταν αναπαραγώγιμες και δεν είχαν σαφή σχέση απόκρισης δόσης-.¹Ομοίως, στη δοκιμή χρωμοσωμικών εκτροπών με χρήση κυττάρων CHO, το PAOS θεωρήθηκε αρχικά κλαστογονικό υπό συνθήκες συνεχούς θεραπείας. Μια-επακόλουθη έρευνα αποκάλυψε ότι αυτή η επίδραση εξαρτιόταν σε μεγάλο βαθμό από την κυτταροτοξικότητα και τον χρησιμοποιούμενο διαλύτη (DMSO). Όταν το PAOS εναιωρήθηκε σε μέσο καλλιέργειας-ένα πιο σχετικό φυσιολογικό φορέα-παρατηρήθηκε σημαντική αύξηση στα ανώμαλα κύτταρα μόνο στην υψηλότερη συνιστώμενη δόση (

5000 ug/ml) και συσχετίστηκε με υψηλή κυτταροτοξικότητα (MI 34%), οδηγώντας τους συγγραφείς στο συμπέρασμα ότι δεν ήταν βιολογικά σχετικό.¹Αυτά τα ευρήματα υποδηλώνουν το θετικό

in vitroΤα αποτελέσματα ήταν πιθανώς τεχνουργήματα που οδηγούνται από την κυτταροτοξικότητα, έναν γνωστό παράγοντα σύγχυσης σε τέτοιες αναλύσεις.

Το οριστικό προφίλ ασφάλειας In Vivo

Τα πιο σχετικά φυσιολογικά δεδομένα για την εκτίμηση του γονιδιοτοξικού κινδύνου προέρχονται απόin vivoσπουδές. Μια δοκιμή μικροπυρήνων ενσωματώθηκε στη μελέτη υποχρόνιας στοματικής τοξικότητας διάρκειας 13- εβδομάδων σε αρουραίους, μια σχεδίαση που εξασφαλίζει παρατεταμένη έκθεση στην ελεγχόμενη ουσία και τους μεταβολίτες της. Η μελέτη, η οποία περιελάμβανε επίσης έναστη μήτραφάση έκθεσης, έδειξε ότι το PAOS δεν επηρέασε τη γονική υγεία, τη γονιμότητα, την αναπαραγωγή ή τα χαρακτηριστικά του κουταβιού.¹Το πιο σημαντικό, ανάλυση των κυττάρων του μηριαίου μυελού των οστών από αρουραίους στην ομάδα υψηλής- δόσης (10% PAOS στη διατροφή, πρόσληψη που υπερβαίνει

7 g/kg σωματικού βάρους/ημέρα) δεν αποκάλυψε αύξηση στον μέσο αριθμό πολυχρωματικών ερυθροκυττάρων με μικροπυρήνα σε σύγκριση με τους ελέγχους.¹Επιπλέον, η αναλογία πολυχρωματικών προς νορμοχρωματικών ερυθροκυττάρων παρέμεινε αμετάβλητη, υποδεικνύοντας ότι δεν υπάρχει κυτταροτοξικότητα στον μυελό των οστών.¹Αυτό το αρνητικό

in vivoΤο αποτέλεσμα παρέχει οριστικές ενδείξεις ότι το PAOS δεν έχει γονοτοξική δράση υπό φυσιολογικές συνθήκες.

Μηχανιστική διαλεύκανση ενός είδους-Συγκεκριμένο τεχνούργημα

Η υπο-χρόνια μελέτη αποκάλυψε διάχυτη ουροθηλιακή υπερπλασία σε αρουραίους που τρέφονταν με 10% PAOS. Αντί να είναι ένας δείκτης άμεσης τοξικότητας από τους ολιγοσακχαρίτες, αυτό υποτέθηκε ότι είναι δευτερεύον αποτέλεσμα. Μια συμπληρωματική μηχανιστική μελέτη σχεδιάστηκε για να ελέγξει την υπόθεση ότι η υπερπλασία προκλήθηκε από την ταυτόχρονη αύξηση της συγκέντρωσης νατρίου στα ούρα και του pH, μια κατάσταση που είναι γνωστό ότι προκαλεί αυτό το ειδικό αποτέλεσμα σε αρουραίους.¹Η μελέτη περιελάμβανε μια ομάδα που τροφοδοτήθηκε με 10% PAOS συν τον παράγοντα οξίνισης

NH4 Cl. Τα αποτελέσματα ήταν αδιαμφισβήτητα: το χαμηλό pH των ούρων στην ομάδα NH4​Clαπέτρεψε πλήρως την ανάπτυξη ουροθηλιακής υπερπλασίας.¹Αυτό επιβεβαίωσε τον μηχανισμό και έδειξε ότι το αποτέλεσμα δεν είναι εγγενές στο PAOS, αλλά είναι ένα είδος-ειδικό τεχνούργημα της φυσιολογίας του ουροποιητικού, το οποίο δεν θεωρείται σχετικό με τον άνθρωπο.¹

Η αυστηρότητα που επιδεικνύεται σε αυτές τις μελέτες αντικατοπτρίζει την επιστημονική δέσμευση κορυφαίων παραγωγών όπως η Zhejiang Gold Kropn Biotechnology Co., Ltd. Ως εθνική-επιχείρηση υψηλής τεχνολογίας που συνεργάζεται με πανεπιστήμια κορυφαίας-βαθμίδας, η εταιρεία δίνει προτεραιότητα όχι μόνο στην κατασκευή αλλά και στη βαθιά επιστημονική κατανόηση των προϊόντων της. Η χρήση προηγμένης ενζυματικής υδρόλυσης σε μια εγκατάσταση πιστοποιημένης ποιότητας 100.000-GMP- εξασφαλίζει την παραγωγή υψηλής καθαρότηταςτροποποιημένη πηκτίνη εσπεριδοειδώνκατάλληλο για απαιτητικές εφαρμογές έρευνας και ανάπτυξης. Για να ζητήσετε τεχνικές προδιαγραφές, πιστοποιητικό ανάλυσης ή για να συζητήσετε ερευνητικές συνεργασίες, επικοινωνήστε με το wilson@zjgykp.com.

Συμπέρασμα: Ένα καλά-χαρακτηρισμένο συστατικό για έρευνα και ανάπτυξη

Η τροποποιημένη πηκτίνη εσπεριδοειδών (PAOS) ​​είναι ένα υλικό με διεξοδικά διερευνημένο και ευνοϊκό προφίλ ασφάλειας. Τα αναλυτικά δεδομένα δείχνουν ότι δεν είναι-μεταλλαξιογόνοςin vivo, και πιθανές ανησυχίες απόin vitroαναλύσεις έχουν εκλογικευθεί ως τεχνουργήματα κυτταροτοξικότητας. Η παρατήρηση της υπερπλασίας του ουροθηλίου σε αρουραίους έχει εξηγηθεί μηχανικά ως μια ειδική απόκριση του είδους- στην αλλοιωμένη χημεία των ούρων και δεν σχετίζεται με τον άνθρωπο. Η υψηλή καθαρότητα του υλικού και τα εξαιρετικά χαμηλά επίπεδα ρύπων, συμπεριλαμβανομένων των βαρέων μετάλλων, το καθιστούν ένα καλά-χαρακτηρισμένο και αξιόπιστο συστατικό για περαιτέρω έρευνα και ανάπτυξη στους τομείς της διατροφής και της φαρμακολογίας.

Έργα που αναφέρονται

ασφάλεια πηκτίνης 1.pdf